Get Adobe Flash player

ВИЗНАЧЕННЯ НЕКУЛЬТУРАБЕЛЬНОГО СТАНУ ЕНТЕРОБАКТЕРІЙ ЗА ОЗНАКОЮ ЕЛЕКТРОХІМІЧНОЇ АКТИВНОСТІ

Автор: Суходуб Л.Б., Юдін І.П., Гушилик Б.І., Похил С.В., Казмірчук В.В.

Сторінки: 51-56

Анотація

         

Під впливом оточуючого середовища бактерії з патогенними властивостями можуть переходити в життєздатний, але некультурабельний стан, який характеризується неспроможністю мікроорганізмів до росту in vitro. Показник оцінки життєздатності мікроорганізмів є достатньо залежним від особливостей використаного методу і суб’єктивного чинника, тому стає більш актуальним точний кількісний аналіз життєздатних бактерій у досліджуваному матеріалі. Задачею даного дослідження стала розробка методики визначення некультурабельного стану бактерій E. coli, S. sonnei, S. flexneri, S. enteritidis , спричиненого дією біоциду - гіпохлориту натрію методом флюоресцентної мікроскопії на мембранних фільтрах із застосуванням флюорохромів родамін 123 для ідентифікації життєздатних клітин та йодиду пропідію, як індикатора неживих клітин. Результати досліджень показали, що навіть через 300 секунд дії біоциду у дозі 1мг/л активного хлору ще вдається виявляти життєздатні мікроорганізми, в той час, як при стандартному методі висіву на тверде поживне середовище культурабельність E. coli, S. enteritidis спостерігається тільки після 10 секундної дії біоциду вказаної концентрації, а S. sonnei та S. flexneri за зазначених умов взагалі не проявляють росту. Всі досліджені мікроорганізми, культивовані при температурі 20 оС, виявилися більш стійкими до дії біоциду, ніж культивовані при 37 оС.

Ключові слова: ентеробактерії, некультурабельний стан, метод флюоресцентної мікроскопії на мембранних фільтрах.

Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

Список літератури

  1. Волянський, Ю. Л. Некультурабельний стан аспорогенних бактерiй: теоретичнi аспекти проблеми та її практична значущiсть / Ю.Л.Волянський // Iнфекцiйнi хвороби. - 2004. - №1. - С.5-9.
  2. Rollins, D., ColwellR. ViablebutnonculturablestageCampylobacterjejunianditsroleinsurvivalinthenaturalaquaticenvironment / Rollins, D., Colwell, R //Appl.
  3. Xu, H. Survival and viability of nonculturable Escherichia coli and Vibrio cholerae in estuarine and marine environment [Text] / H. Xu, N. Roberts, F. Singleton, R. Attwell, D. Grimes, R. Colwell // Microb. Ecol. – 1982. – V. 8. – P. 313-323.
  4. Oliver, J. D. Recent findings on the viable but nonculturable state in pathogenic bacteria [Electronic resource] / J. D. Oliver // FEMS Microbiology Reviews – 2010. – V. 34. – № 4. – P. 415–425.
  5. Morishige, Y. Differential Resuscitative Effect of Pyruvate and its Analogues on VBNC (Viable But Non-Culturable) Salmonella / Y. Morishige, K. Fujimori, F. Amano // Microbes Environ. – 2013. – V. 28(2). – Р. 180–186.
  6. Jayaraman, S. A novel method for the detection of viable human pancreatic beta cells by flow cytometry using fluorophores that selectively detect labile zinc, mitochondrial membrane potential and protein thiols. / S. Jayaraman. // Cytometry Part A – 2008. – V. 73A. – Р. 615–625.
  7. Hewitt, C. J. An industrial application of multiparameter flow cytometry: assessment of cell physiological state and its application to the study of microbial fermentations. / C. J. Hewitt, G. Nebe-von-Caron // Cytometry – 2001. – V. 44. – Р. 179–187.